ACTUALITESMARVELACTUALITESMARVELUn an après les événements du premier film, Miles Morales retrouve Gwen Stacy lors d'une nouvelle menace à Brooklyn. Ensemble, ils rejoignent la Spider-Society, une organisation multiverselle dirigée par Miguel O'Hara, alias Spider-Man 2099, qui rassemble des centaines de Spider-héros issus de réalités différentes. Miles découvre alors l'existence des événements canon : des tragédies inévitables qui définissent chaque Spider-héros et que la Spider-Society s'interdit de modifier, au risque de détruire des univers entiers. Lorsque Miles apprend que la mort imminente de son père fait partie de ces événements prédestinés, il refuse de l'accepter. Considéré comme une anomalie car il a été mordu par une araignée qui ne lui était pas destinée, il entre en conflit avec toute la Spider-Society.
Miles s'échappe de la Spider-Society et tente de rentrer dans son univers pour sauver son père. Mais le portail le conduit sur la Terre-42, un univers parallèle dépourvu de Spider-Man, où il se retrouve face à une version sombre de lui-même devenue le Prowler. Pendant ce temps, Gwen, déterminée à aider Miles, rassemble sa propre équipe de Spider-héros. Le film se termine sur un cliffhanger, laissant Miles prisonnier sur la Terre-42 alors que ses alliés se mobilisent pour le retrouver.
Les événements de Spider-Man : Across the Spider-Verse se déroulent en 2025 dans leur propre univers autonome du Spider-Verse, principalement ancré sur la Terre-1610.
Spider-Man : Across the Spider-Verse multiplie les ponts avec les productions de Marvel Studios grâce à plusieurs caméos en prises de vues réelles. L'acteur Donald Glover apparaît sous les traits d'une version alternative d'Aaron Davis, personnage qu'il a déjà incarné dans Spider-Man : Homecoming. Le long-métrage inclut aussi des extraits vidéo des films de Tobey Maguire et d'Andrew Garfield pour confirmer leur existence au sein de cette même toile complexe. Une scène montre également une interaction avec Madame Chen de la Terre-688, la commerçante des films Venom du SSU. Ces apparitions prouvent que les films animés de la Terre-1610 et les films en prise de vues réelles possèdent un multivers commun.
Le jeu Spider-Man 2 de la Terre-1048 contient une quête secrète liée à la collecte de 42 Spider-Bots. Une fois cette mission terminée, un portail identique à ceux du film s'ouvre pour laisser apparaître Delilah, une barmaid retirée du montage final de Across the Spider-Verse. Au cours de cet échange, elle mentionne explicitement Miguel O'Hara, le chef de la Spider-Society. Cette rencontre confirme que l'univers des jeux vidéo d'Insomniac Games appartient officiellement à ce multivers commun exploré au cinéma.